各种电泳设备技术的不同应用介绍

2020-04-30 05:42:55

聚丙烯酰胺凝胶电泳可用做蛋白质纯度的鉴定.聚丙烯酰胺凝胶电泳同时具有电荷效应和分子筛效应,可以将分子大小相同而带不同数量电荷的物质分离开,并且还可以将带相同数量电荷而分子大小不同的物质分离开。

1.聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于鉴定蛋白质的纯度。聚丙烯酰胺凝胶电泳既有电荷效应又有分子筛效应,既可以分离相同分子大小但不同电荷的物质,也可以分离相同电荷大小但不同分子大小的物质。其分辨率远远高于普通的色谱和电泳方法。可检测10-9 ~ 10-12g样品,重复性好,无电渗现象。

2.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于测定蛋白质的分子量。其原理是将带有大量电泳线电荷的SDS结合到蛋白质分子上,克服蛋白质分子原始电荷的影响,获得恒定的荷质比。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳已成功用于蛋白质分子量的测定。该方法具有测定时间短、分辨率高、样品少(1 ~ 100μ g)等优点,但仅适用于球形或基本球形的蛋白质。有些蛋白质不容易与SDS结合,如木瓜蛋白酶、核糖核酸酶等。此时,测定结果不准确。

3.聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于蛋白质定量。电泳后的凝胶由凝胶扫描仪扫描以给出定量结果。凝胶扫描仪主要用于对样品进行一维电泳后的区域和二维电泳后的斑点进行扫描。

4.琼脂或琼脂糖凝胶免疫电泳可用于

(1)检查蛋白质制剂的纯度;

(2)分析蛋白质混合物的成分;

(3)研究抗血清制剂是否具有针对某些已知抗原的抗体;④检查两种抗原是否相同。

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